滅菌是指用物理或化學(xué)方法將所有致病和非致病的微生物全部殺死。滅菌法是指殺滅或除去所有微生物的繁殖體和芽孢或孢子的技術(shù)。微生物包括細(xì)菌、真菌、病毒等。微生物的種類(lèi)不同、則滅菌方法不同，滅菌效果也不同。細(xì)菌的芽孢具有較強(qiáng)的抗熱能力，因此滅菌效果，常以殺滅芽孢為準(zhǔn)。消毒是指殺滅物體上的微生物的繁殖體，不能保證殺死芽孢或孢子。滅菌與消毒在藥品生產(chǎn)過(guò)程中是極為重要的，它是藥品生產(chǎn)過(guò)程中一項(xiàng)重要的操作，也是保證藥品質(zhì)量的重要措施之一。
滅菌涉及到廠(chǎng)房、設(shè)備、容器、潔具、工作服裝、原輔材料、成品、包裝材料，儀器等等的滅菌。無(wú)菌藥品特別是注射液、供角膜創(chuàng)傷或手術(shù)用滴眼劑等無(wú)菌制劑是直接進(jìn)入人體血液循環(huán)系統(tǒng)而產(chǎn)生療效的藥品，所以對(duì)其質(zhì)量有特殊要求，它必須符合藥典無(wú)菌檢查的要求。為此，在生產(chǎn)過(guò)程中，要努力消除微生物的污染，殺滅藥品中的微生物，這就是滅菌要達(dá)到的目的。
滅菌的方法基本上分為二大類(lèi)：物理方法（干熱滅菌、濕熱滅菌、射線(xiàn)滅菌、濾過(guò)滅菌）和化學(xué)方法（氣體滅菌、藥液滅菌）。下面將分別介紹幾種常用的滅菌方法。
第一節(jié)  干熱滅菌法及其設(shè)備
一、干熱滅菌
干熱可用于能耐受較高溫度，卻不宜被蒸汽穿透，或者易被濕熱破壞的物品的滅菌。同時(shí)干熱也是制藥工業(yè)中用于除熱原的方法之一。由于在相同的溫度下，干熱對(duì)微生物的殺滅效果遠(yuǎn)低于飽和蒸汽，故干熱滅菌需要較高的溫度或較長(zhǎng)的滅菌時(shí)間。
凡用濕熱滅菌法無(wú)效的非水性物質(zhì)或極粘稠的液體如甘油、液狀石蠟、油類(lèi)等可用本法滅菌。滅菌時(shí)，油類(lèi)、軟膏基質(zhì)或粉末應(yīng)鋪成不超過(guò)0.6cm的薄層，使熱更好的透入。
評(píng)價(jià)干熱法滅菌的相對(duì)滅菌能力時(shí)，一般可采用相似于Fo值的致死率單位和生物指示劑。Fo值與濕熱滅菌系統(tǒng)驗(yàn)證中使有的Fo值的不同點(diǎn)是：評(píng)價(jià)干熱滅菌過(guò)程的相對(duì)滅菌能力的Fo值是將時(shí)間與溫度條件的改變折算成170℃時(shí)的相當(dāng)時(shí)間，同時(shí)設(shè)定Z值為20℃即FH值。BP1993年版規(guī)定，僅以滅菌為最終目的干熱滅菌系統(tǒng)，必須保證其最小的FH值大于170℃   60min。對(duì)于采用干熱存活概率法滅菌的系統(tǒng)，驗(yàn)證結(jié)果應(yīng)能證明其滅菌過(guò)程保證對(duì)耐熱微生物的殺滅效果達(dá)到認(rèn)可的低存活概率，一般未被殺滅的概率為10~6，即滅菌物品經(jīng)過(guò)滅菌后殘存微生物污染的可能性為百萬(wàn)分之一。對(duì)于采用干熱過(guò)度殺滅法滅菌系統(tǒng)的驗(yàn)證結(jié)果，應(yīng)證明其滅菌過(guò)程保證對(duì)干熱呈高度耐受性的微生物產(chǎn)生大于12個(gè)log的遞減，取得低于10~12的微生物存活概率，即滅菌物品經(jīng)過(guò)滅菌后殘存的微生物污染可能性低于百萬(wàn)分之一，同時(shí)在做過(guò)度殺滅法滅菌過(guò)程驗(yàn)證時(shí)不需要做常規(guī)的帶菌量的估價(jià)。
二、干熱滅菌的主要設(shè)備
干熱滅菌的主要設(shè)備有干熱滅菌柜、隧道滅菌系統(tǒng)。干熱滅菌設(shè)備一般由下列幾個(gè)重要部分組成：
1、加熱器——它是干熱滅菌設(shè)備的主要組成部分，對(duì)滅菌效果的好壞影響極大。加熱器故障是造成干熱滅菌設(shè)備滅菌效果下降的主要原因之一，其主要表現(xiàn)為升溫速度下降；影響熱分布；產(chǎn)生塵埃物質(zhì)。而造成加熱器故障的原因主要是加熱器的長(zhǎng)期使用或通過(guò)加熱器的空氣質(zhì)量較差所致。所以一般應(yīng)在滅菌器的加熱系統(tǒng)配置電流監(jiān)測(cè)器，以及時(shí)發(fā)現(xiàn)其故障。
2、高效過(guò)濾器——在干熱滅菌設(shè)備中，進(jìn)風(fēng)應(yīng)通過(guò)高效過(guò)濾器；除去內(nèi)部空氣循環(huán)系統(tǒng)中產(chǎn)生的塵埃物質(zhì)需要高效過(guò)濾器，防止排風(fēng)倒流的污染也可裝高效過(guò)濾器。所以高效過(guò)濾器必須滿(mǎn)足干熱滅菌工藝用風(fēng)量的要求，并能承受相應(yīng)的風(fēng)壓。
3、緩沖板、風(fēng)閥、氣流調(diào)節(jié)器或空氣檔板——緩沖板或空氣檔板用于控制干熱滅菌器的空氣流量，多安裝于進(jìn)風(fēng)或排風(fēng)風(fēng)管或加熱器附近，用于正壓控制。氣流調(diào)節(jié)器可以安裝排風(fēng)系統(tǒng)中的防止倒流風(fēng)污染的高效過(guò)濾器附近，通過(guò)控制排風(fēng)量控制正壓，也可以用氣流調(diào)節(jié)器控制進(jìn)風(fēng)和排風(fēng)風(fēng)量以保持正壓。一般情況下，干熱滅菌器腔室內(nèi)的壓力略高于其相臨的非無(wú)菌區(qū)而略低于其相臨的無(wú)菌區(qū)。
4、風(fēng)機(jī)——對(duì)干熱滅菌器中的氣流循環(huán)影響很大，風(fēng)機(jī)的風(fēng)量應(yīng)該可以測(cè)量，并可調(diào)整，必要時(shí)可以要求供應(yīng)商將此項(xiàng)要求增加到其設(shè)備標(biāo)準(zhǔn)中，因?yàn)轱L(fēng)機(jī)風(fēng)量的測(cè)量指示值，可以為設(shè)備使用過(guò)程中檢查風(fēng)機(jī)狀態(tài)提供依據(jù)。
5、傳送帶（僅適用于連續(xù)法）——傳送帶的速度，在連續(xù)傳送干熱滅菌系統(tǒng)中是十分重要的滅菌效果影響因素。目前大多數(shù)干熱連續(xù)法滅菌系統(tǒng)中已設(shè)有傳送帶速度控制器，但較少有速度記錄裝置。由于傳送帶速度決定了物料經(jīng)過(guò)滅菌器時(shí)所接受的熱量，所以其速度記錄是證明滅菌器在控制狀態(tài)下運(yùn)行的基本資料之一，生產(chǎn)工藝中亦有必要保存每次滅菌過(guò)程的傳送帶速度的記錄。同時(shí)干熱滅菌器的SOP，也應(yīng)明確規(guī)定各種滅菌過(guò)程傳送帶的運(yùn)行速度范圍，此運(yùn)行速度范圍應(yīng)是經(jīng)過(guò)驗(yàn)證確定的。
6、運(yùn)行連鎖控制系統(tǒng)——干熱滅菌器中連鎖控制系統(tǒng)設(shè)有：門(mén)連鎖控制系統(tǒng)；壓力傳感器；溫度傳感、控制、停止傳送帶運(yùn)行的連鎖控制裝置等，以保證在任何情況下出現(xiàn)溫度低于設(shè)計(jì)要求時(shí)防止滅菌物品在低于滅菌溫度的情況下通過(guò)滅菌器。
7、溫度控制器及記錄儀——在干熱滅菌系統(tǒng)中，溫度探測(cè)、傳感、控制、記錄系統(tǒng)是整個(gè)滅菌過(guò)程控制的基礎(chǔ)，其控制系統(tǒng)必須能保證滅菌器腔室內(nèi)滅菌溫度可以保持在設(shè)定的滅菌溫度范圍內(nèi)，其記錄系統(tǒng)必須將溫度探測(cè)、傳感系統(tǒng)的溫度讀數(shù)準(zhǔn)確無(wú)誤地記錄清楚。
第二節(jié)  濕熱滅菌法及其設(shè)備
一、濕熱滅菌法
是在飽和蒸汽或沸水或流通蒸汽中進(jìn)行滅菌的方法。由于蒸汽潛熱大，穿透力強(qiáng)，容易使蛋白質(zhì)變性或凝固，所以滅菌效率比干熱滅菌法高。這是注射劑生產(chǎn)中應(yīng)用廣泛的一種滅菌方法，它具有滅菌可靠，操作方便，易于控制和經(jīng)濟(jì)等優(yōu)點(diǎn)。但不適用于對(duì)濕熱不穩(wěn)定的藥物的滅菌。
影響濕熱滅菌的因素有：
1、細(xì)菌的種類(lèi)與數(shù)量：不同細(xì)菌，同一細(xì)菌的不同發(fā)育階段對(duì)熱的抵抗力有所不同。細(xì)菌數(shù)越少，滅菌時(shí)間越短，如注射劑中即使細(xì)菌全部殺死，而注射液中的細(xì)菌尸體過(guò)多，也會(huì)引起臨床上的不良反應(yīng)。
2、藥物性質(zhì)與滅菌時(shí)間：一般來(lái)說(shuō)，滅菌溫度越高滅菌時(shí)間越短，但考慮到藥物的穩(wěn)定性，應(yīng)在達(dá)到有效滅菌的前題下可適當(dāng)降低滅菌溫度或縮短滅菌時(shí)間。如維生素C注射液用流通蒸汽15分鐘滅菌，Nacl輸液115℃30分鐘滅菌。
3、蒸汽的性質(zhì)：蒸汽有飽和蒸汽，濕飽和蒸汽和過(guò)熱蒸汽。飽和蒸汽熱含量較高，熱穿透力較大，因此滅菌效力高。濕飽和蒸汽帶有水分，熱含量較低，穿透力差，滅菌效力較低。過(guò)熱蒸汽溫度高于飽和蒸汽，但穿透力差，滅菌效率低。
4、介質(zhì)的性質(zhì)：制劑中含有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如糖類(lèi)、蛋白質(zhì)等，增強(qiáng)細(xì)菌的抗熱性。細(xì)菌的生存能力也受介質(zhì)PH值的影響。一般中性環(huán)境耐熱性最大，堿性次之，酸性不利于細(xì)菌發(fā)育。
二、濕熱滅菌法的主要設(shè)備
濕熱滅菌法的主要設(shè)備是滅菌釜，滅菌釜種類(lèi)很多，性能差異也很大，但其基本結(jié)構(gòu)大同小異，所用的材質(zhì)為堅(jiān)固的合金?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)很多企業(yè)使用的方型高壓滅菌釜，能密閉耐壓，有排氣口、安全閥、壓力和溫度指示裝置。帶有夾套的滅菌柜備有帶軌道的格車(chē)，分為若干格。滅菌柜頂部裝有壓力表二只，一只指示蒸汽夾套內(nèi)的壓力，另一只指示柜室內(nèi)的壓力，兩壓力表中間為溫度計(jì)。滅菌柜的上方還應(yīng)安裝排氣閥，以便開(kāi)始通入加熱蒸汽時(shí)排除不凝性氣體。近年來(lái)，有些制藥企業(yè)已經(jīng)開(kāi)始采用具有抽真空能力及Fo控制的蒸汽滅菌釜，目前國(guó)內(nèi)采用的進(jìn)口滅菌釜主要有二種：一種以蒸汽為滅菌介質(zhì)的旋轉(zhuǎn)式滅菌釜，如奧地利的HDRR009.20/IS，另一種以過(guò)熱水作介質(zhì)的噴淋式滅菌釜，如意大利FEDEGARI公司的FOW5—500。進(jìn)口滅菌釜的主要優(yōu)點(diǎn)是批次量較大，溫度控制系統(tǒng)準(zhǔn)確度及精密度較好，產(chǎn)品滅菌過(guò)程中受熱比較均勻。
滅菌釜的基本滅菌程序?yàn)椋?br /> 裝瓶   →  升溫、進(jìn)蒸汽置換空氣  →  滅菌  → 排汽→ 預(yù)熱水冷卻 →卸瓶。
三、脈動(dòng)真空滅菌器使用的注意事項(xiàng)：
1、必須將滅菌器內(nèi)的空氣排出。如果滅菌器內(nèi)有空氣存在，則表上所表示的壓力是蒸汽和空氣二者的總壓而非單純的蒸汽壓力。結(jié)果壓力雖然達(dá)到預(yù)定水平，但溫度達(dá)不到。若表壓與溫度表指示不一致，則有可能空氣沒(méi)有排盡，也可能壓力表失靈，也可能是不飽和蒸汽，應(yīng)找出原因加以解決。
2、滅菌時(shí)間必須由全部藥液真正達(dá)到所要求的溫度時(shí)算起，濕熱滅菌時(shí)的預(yù)熱時(shí)間（升溫時(shí)間）雖可較干熱時(shí)間的短，但測(cè)定和縮短預(yù)熱時(shí)間的重要性，也決不次于干熱滅菌。例如250ml —500ml玻瓶輸液，預(yù)熱時(shí)間一般為15~30分鐘，多者可達(dá)45分鐘。
3、滅菌完畢后，停止加熱，一般須使壓力表所指示的壓力逐漸下降到零后，才能放出鍋內(nèi)蒸汽，使鍋內(nèi)壓力與大氣壓相等后，稍稍打開(kāi)滅菌鍋，待10~15分鐘后，再全部打開(kāi)。這樣可避免內(nèi)外壓力差太大而使物品沖出鍋外和使玻璃瓶爆裂。這點(diǎn)必須注意以免發(fā)生工傷事故。為了縮短滅菌周期，也有往滅菌器內(nèi)盛裝有溶液的封閉容器噴霧冷卻水，加速冷卻。以水溫18℃，霧滴大小80μm的噴霧時(shí)的冷卻效果最大，過(guò)冷過(guò)粗的噴霧將引起瓶子的爆破。對(duì)于滅菌后要求干燥但又不易破損的物料，滅菌后立即放出滅菌器內(nèi)蒸汽，以利干燥。
四、流通蒸汽滅菌法和煮沸滅菌法
流通蒸汽滅菌法是在不密閉的容器內(nèi)，用蒸汽滅菌，壓力與大氣壓相等，即100℃的蒸汽滅菌。目前我國(guó)藥廠(chǎng)生產(chǎn)注射劑，特別是1~2ml的注射劑及不耐高溫的品種，基本上都采用此法，煮沸滅菌法就是把安瓿或其它物品放入水中煮沸滅菌。流通蒸汽滅菌與煮沸滅菌，一般是100℃30分鐘至60分鐘。此法不能保證殺滅所有芽孢，例如破傷風(fēng)桿菌等厭氧性細(xì)菌的芽孢，故制備過(guò)程中要盡可能避免污染?？捎脽釅簻缇鏖_(kāi)啟排汽閥進(jìn)行滅菌。在農(nóng)村或野戰(zhàn)條件下亦可采用蒸籠來(lái)滅菌，若在高原地區(qū)，由于水的沸點(diǎn)降低，因此在水中常加入1~2%碳酸鈉，5%苯酚等以提高水的沸點(diǎn)；但也有用延長(zhǎng)滅菌時(shí)間的方法來(lái)解決的。一般每升高300公尺，延長(zhǎng)滅菌時(shí)間20%。此法對(duì)增殖型微生物的滅菌效果大，但不能保證殺滅芽孢。
五、低溫間歇滅菌法
此法是將待滅菌的制品，用60~80℃加熱1小時(shí)，將其中的細(xì)菌繁殖體殺死，然后在室溫或孵卵箱中放置24小時(shí)其中芽孢發(fā)育成繁殖體，再第二次滅菌。連續(xù)操作三次以上，至全部芽孢消滅凈為止。此法適用于必須用熱法滅菌但又不耐較高溫度的制劑或藥品。缺點(diǎn)是時(shí)間長(zhǎng)，消滅芽孢的效果不夠完全。應(yīng)用本法滅菌的制劑或藥品，除本身具有抑菌力者外，須加適量抑菌劑，以增加滅菌效力。
以上幾種滅菌方法為濕熱滅菌法的幾種滅菌方式，本廠(chǎng)現(xiàn)采用熱壓滅菌法和煮沸滅菌法，如口服液車(chē)間采用對(duì)藥液采用煮沸滅菌40分鐘，對(duì)C型瓶、瓶蓋采用121℃20分鐘或105℃30分鐘滅菌，如果口服液采用最終滅菌時(shí)，灌封完成的藥品在規(guī)定時(shí)間內(nèi)采用105℃30分鐘滅菌。
第三節(jié)  其他滅菌方法及消毒方法
一、輻射滅菌法
以放射性同位素（60C0或137Cs）放射的γ射線(xiàn)殺菌的方法。射線(xiàn)可使有機(jī)化合物的分子直接發(fā)生電離，產(chǎn)生破壞正常代謝的自由基，導(dǎo)致微生物體內(nèi)的分子化合物分解。輻射滅菌的特點(diǎn)是不升高滅菌產(chǎn)品的溫度，穿透性強(qiáng)，適合于不耐熱藥物的滅菌，醫(yī)療器械、高分子材料、包裝材料等滅菌。滅菌劑量一般可用2.5×104GY(戈瑞)。此法已為《英國(guó)藥典》（1998），《日本藥局方》十三版所載。我國(guó)有些企業(yè)亦有用60C0對(duì)某些中藥和醫(yī)療器械進(jìn)行滅菌。輻射滅菌，制備費(fèi)用高，對(duì)某些藥品可能產(chǎn)生藥效降低，產(chǎn)生毒性物質(zhì)或發(fā)熱物質(zhì)，使用輻射滅菌還應(yīng)注意安全防護(hù)措施。
二、紫外線(xiàn)滅菌法
是指用紫外線(xiàn)照射殺滅微生物的方法。一般用于滅菌的紫外線(xiàn)波長(zhǎng)是200~300nm，滅菌力最強(qiáng)的波長(zhǎng)是253.7nm。紫外線(xiàn)作用于核酸蛋白促使其變性，同時(shí)空氣受紫外線(xiàn)照射后產(chǎn)生微量臭氧，從而起共同殺菌作用。紫外線(xiàn)進(jìn)行直線(xiàn)傳播，可被不同的表面反射，穿透力微弱，但較易穿透清潔空氣及純凈的水。因此本法適用于照射物體表面之滅菌、無(wú)菌室的空氣及水的滅菌；不適用于藥液的滅菌、固體物質(zhì)深部的滅菌；普通玻璃可吸收紫外線(xiàn)，因此裝于玻璃容器中的藥物不能用此法滅菌。紫外線(xiàn)對(duì)人體照射過(guò)久，會(huì)發(fā)生結(jié)膜炎，紅斑及皮膚燒灼等現(xiàn)象，故一般在人入室前開(kāi)啟紫外線(xiàn)燈1~2小時(shí)，關(guān)閉后人才進(jìn)入潔凈室。如果必須在人進(jìn)去后仍要開(kāi)紫外線(xiàn)滅菌，則人的皮膚及眼睛應(yīng)有有效的防護(hù)措施。一般在6~15m3的空間可裝置30瓦紫外線(xiàn)燈一盞，離地面2.5~3m為宜。
用紫外線(xiàn)照射滅菌時(shí)要注意下列問(wèn)題：
1、紫外線(xiàn)的殺菌力，隨使用時(shí)間增加而減退，一般使用時(shí)間達(dá)到額定時(shí)間70%時(shí)應(yīng)更換紫外線(xiàn)燈管，以保證殺菌效果。國(guó)產(chǎn)紫外線(xiàn)燈平均壽命一般為2000h。
2、紫外線(xiàn)的殺菌作用隨菌種不同而不同，殺霉菌的照射量要比殺桿菌大40~50倍。
3、紫外線(xiàn)照射通常按相對(duì)濕度為60%的基礎(chǔ)設(shè)計(jì)，室內(nèi)濕度增加時(shí)，照射量應(yīng)相應(yīng)增加。
4、紫外線(xiàn)滅菌效果與照射的時(shí)間長(zhǎng)短有關(guān)，這需要通過(guò)驗(yàn)證來(lái)確定照射時(shí)間。
5、紫外照射燈的安裝形式及高度，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況,參考使用說(shuō)明決定。
三、環(huán)氧乙烷滅菌法
環(huán)氧乙烷滅菌法是利用環(huán)氧乙烷氣體進(jìn)行殺菌的方法。它是一種傳統(tǒng)的滅菌方法，可應(yīng)用于工衣滅菌、不耐加熱滅菌的藥品、醫(yī)用器具、設(shè)施、設(shè)備等的滅菌。環(huán)氧乙烷滅菌系統(tǒng)，主要有下列四項(xiàng)互相制約的重要因素影響滅菌效果：
1、溫度；
2、濕度；
3、氣體濃度；
4、滅菌時(shí)間。
因?yàn)榄h(huán)氧乙烷是易燃易爆物質(zhì)，明火可以引起燃燒，同時(shí)由于氣體分解還可能引起爆炸，環(huán)氧乙烷滅菌中應(yīng)十分注意安全問(wèn)題。
環(huán)氧乙烷具有非常強(qiáng)的滲透和擴(kuò)散能力，其滅菌的機(jī)理主要是強(qiáng)氧化，因此具有殺菌譜廣，滅菌能力強(qiáng)的特點(diǎn)，對(duì)微生物的繁殖體、芽孢有較強(qiáng)的殺滅效果。雖然環(huán)氧乙烷在高濃度時(shí)有刺激性臭味和毒性，但屬中度毒性，一般可以很快揮發(fā)，不會(huì)在系統(tǒng)內(nèi)表面殘留余毒。
滅菌機(jī)理主要是它的烷基的取代性質(zhì)、細(xì)菌蛋白質(zhì)分子中的-cooH、-NH2、- OH、SH基上的氫原子被環(huán)氧乙烷的羥乙基基團(tuán)所取代而使菌體細(xì)胞的代謝產(chǎn)生不可逆性的破壞。
CH2-CH2 +R-SH→R-S-CH2-CH2OHo
        R-SH代表含巰基的蛋白分子。
用環(huán)氧乙烷氣體滅菌的程序，大致為將滅菌物品置于滅菌器內(nèi)，減壓排除空氣，預(yù)熱，環(huán)氧乙烷氣體采用混合氣（一般環(huán)氧乙烷氣體含10-20%，二氧化碳含80~90%），在減壓下輸人混合氣體，保持一定濃度、溫度和濕度，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間后，抽真空排除環(huán)氧乙烷氣體，然后送入無(wú)菌空氣置換環(huán)氧乙烷氣體，直至換凈。
四、濾過(guò)滅菌法
濾過(guò)滅菌法是用濾過(guò)方法除去活的或死的微生物的方法，是一種機(jī)械除菌方法，這種機(jī)械叫除菌過(guò)濾器。主要用于對(duì)熱不穩(wěn)定的藥物溶液、氣體、水的除菌。供滅菌用的濾器，要求能有效地從溶液中除凈微生物，溶液順暢地由濾器通過(guò)，濾液中不落入任何不需要的物質(zhì)，濾器容易清洗，操作簡(jiǎn)便。
繁殖型細(xì)菌很少有小于1μm的，芽胞大小為0.5μum或更小些。所以，對(duì)于以過(guò)篩作用濾過(guò)的濾器，例如纖維素酯膜濾器，其孔徑大小必須小到足以阻止細(xì)菌和芽孢進(jìn)入濾孔之內(nèi)，孔徑約為0.2μm?？孔枇粲诳椎纼?nèi)或靜電作用的濾器孔徑可稍大于所要濾除的顆粒，但壓力過(guò)大或波動(dòng)，顆粒就有被擠過(guò)的可能。通常用測(cè)定孔徑的方法，是用大小為0.7μm左右的靈菌（B.prodigilsus）混懸液濾過(guò)，濾液通過(guò)培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，觀(guān)察有無(wú)靈菌生長(zhǎng)。常用除菌濾器有微孔薄膜器，摺疊式纖維素濾棒，一般選用孔徑0.22μm。濾過(guò)法應(yīng)配合無(wú)菌操作技術(shù)，并必須對(duì)成品進(jìn)行無(wú)菌檢查，以保證其除菌質(zhì)量。濾膜以CH2-CH2滅菌為宜。                                      O
五、臭氧消毒法
臭氧（O3）的消毒原理是：臭氧在常溫、常壓下分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，很快自行分解成氧（O2）和單個(gè)氧原子（O），后者具有很強(qiáng)的活性，對(duì)細(xì)菌有極強(qiáng)的氧化作用，臭氧氧化分解了細(xì)菌內(nèi)部氧化葡萄糖所必須的酶，從而破壞其細(xì)胞膜，將其殺死。多余的氧原子則會(huì)自行重新結(jié)合成為普遍氧分子（O2），不存在任何有害殘留物，故稱(chēng)為無(wú)污染消毒劑。它不但對(duì)種種細(xì)菌（包括肝炎病毒、大腸桿菌、綠膿桿菌及雜菌等）有極強(qiáng)的殺滅能力，而且對(duì)霉菌也很有效。
生產(chǎn)臭氧的原料主要是電能和空氣，一般通過(guò)高頻臭 氧發(fā)生器（電子消毒器）來(lái)獲得，消毒時(shí)，直接將臭氧發(fā)生器置于房間中間即可。
臭氧消毒效果的驗(yàn)證中需確認(rèn)和校正的臭氧發(fā)生器技術(shù)指標(biāo)有：臭氧產(chǎn)量、臭氧濃度和時(shí)間定時(shí)器，并通過(guò)驗(yàn)證檢查細(xì)菌數(shù)來(lái)確定消毒時(shí)間。
六、甲醛消毒方法
1、計(jì)算房間體積，按10g/m3的比例稱(chēng)出甲醛。
2、將甲醛倒入甲醛發(fā)生器或加熱盤(pán)或燒杯中，并放好加濕用水，必要時(shí)還需加入高錳酸鉀（2~3g/m3），然后加熱（甲醛發(fā)生器用蒸汽加熱，加熱盤(pán)或燒杯用熱水盛入其中加熱）使其蒸發(fā)成氣體。
3、滅菌流程：空調(diào)器停止運(yùn)轉(zhuǎn)→ 啟動(dòng)甲醛氣體發(fā)生器或在加熱盤(pán)中加熱甲醛  →讓甲醛氣體擴(kuò)散約30分鐘→ 啟動(dòng)空調(diào)器讓甲醛氣體循環(huán)約30分鐘 →停止空調(diào)器，房間熏蒸消毒，時(shí)間不少于8小時(shí) → 房間排氣，用新鮮空氣置換約2小時(shí)→ 恢復(fù)正常運(yùn)行。
當(dāng)相對(duì)濕度在65%以上，溫度在24~40℃時(shí)，甲醛氣體的消毒效果好。
甲醛消毒滅菌的氣體發(fā)生量、熏蒸時(shí)間、換氣時(shí)間等應(yīng)以驗(yàn)證結(jié)果來(lái)最后確定。也有報(bào)導(dǎo)過(guò)氧乙酸用于車(chē)間的室內(nèi)滅菌，效力比相同濃度的甲醛大兩倍半，對(duì)粘膜無(wú)刺激性，對(duì)木、金屬制品、醫(yī)療器械無(wú)影響。
七、消毒劑消毒
潔凈室的墻面、天花板、門(mén)窗、機(jī)器設(shè)備、儀器、操作臺(tái)、車(chē)、桌、椅等表面以及人體雙手（手套）在環(huán)境驗(yàn)證及日常生產(chǎn)時(shí)，應(yīng)定期清潔并用消毒劑噴灑，常見(jiàn)的消毒劑有異丙醇（75%）、乙醇（75%）、戊二醛（1%）、新潔而滅（0.1~0.2%）等。亦可用0.5~3%石碳酸或2~5%的甲苯酚。
無(wú)菌室用的消毒劑必須在層流工作臺(tái)中，用0.22μm的濾膜過(guò)濾后方能使用。
第四節(jié)滅菌管理要點(diǎn)
一、選用濾過(guò)器材和處理方法應(yīng)符合工藝要求，微孔濾膜使用前后應(yīng)作完整性試驗(yàn)，以保證其滅菌效果。
二、藥液從配制到滅菌開(kāi)始，其間隔不得超過(guò)工藝規(guī)定的時(shí)間。
三、滅菌應(yīng)有溫度、壓力及升溫時(shí)間、恒溫時(shí)間、數(shù)量及全過(guò)程的溫度壓力曲線(xiàn)圖或溫度曲線(xiàn)圖。
四、按批號(hào)進(jìn)行滅菌，不得混批。滅菌前后的中間產(chǎn)品應(yīng)有可靠的防混措施。
五、滅菌設(shè)備使用前都必須進(jìn)行驗(yàn)證，工藝改變或大修后，要進(jìn)行再驗(yàn)證，以確保滅菌效果。
六、滅菌釜宜選擇雙扉式的滅菌釜，使用前應(yīng)進(jìn)行溫度均勻性和滅菌效果的驗(yàn)證，并有記錄，F(xiàn)O值應(yīng)控制在8.0以上。
七、直接接觸藥品的包裝材料、設(shè)備和其他物品的從滅菌到使用時(shí)間間隔應(yīng)有規(guī)定。
八、當(dāng)一個(gè)批號(hào)產(chǎn)品使用多個(gè)滅菌柜滅菌時(shí)，應(yīng)加亞批號(hào)。
第五節(jié)蒸汽滅菌釜驗(yàn)證
蒸氣滅菌釜驗(yàn)證，一般的驗(yàn)證步驟如下：
一、驗(yàn)證方案的制訂；
二、驗(yàn)證方案的批準(zhǔn)；
三、儀表及文件的準(zhǔn)備；
四、預(yù)確認(rèn)；
五、安裝確認(rèn)——電氣安裝、蒸汽安裝、冷支卻水安裝；
六、運(yùn)行確認(rèn)——單機(jī)或系統(tǒng)試車(chē)。
七、性能確認(rèn)——熱分布測(cè)試、熱穿透性試驗(yàn)、生物指示劑驗(yàn)證試驗(yàn)、微生物孢子的挑戰(zhàn)性試驗(yàn)。
八、驗(yàn)證報(bào)告——數(shù)據(jù)分析、驗(yàn)證結(jié)果、評(píng)價(jià)和建議。
九、批準(zhǔn)結(jié)論。
蒸汽滅菌釜驗(yàn)證如何進(jìn)行，原國(guó)家醫(yī)藥管理局批準(zhǔn)GMP、GSP委員會(huì)編寫(xiě)《藥品生產(chǎn)驗(yàn)證指南》（1996年4月出版）P263附錄四"滅菌釜驗(yàn)證示例"可供參考。